Diagnóstico Prenatal Molecular de Distrofia Muscular Duchenne

RESUMEN

Objetivo:

Realizar diagnóstico prenatal molecular directo de distrofia muscular Duchenne.

Métodos:

La investigación se llevó a cabo en el Instituto de Investigaciones Genéticas de la Facultad de Medicina de la Universidad del Zulia. Maracaibo. La detección de deleciones en los fetos, se realizó utilizando los estuches de reacción de PCR múltiple 9-plex: 4, 8, 12, 17, 19, 44, 45, 48, 51 y 5-plex: Pm, 13, 43, 50, 52.

Resultados:

El estudio molecular detectó tres fetos masculinos afectados con distrofia muscular Duchenne y cuatro fetos masculinos sanos.

Conclusión:

El diagnóstico prenatal molecular de distrofia muscular Duchenne es un importante aporte para la medicina preventiva y el asesoramiento genético.

INTRODUCCIÓN

La distrofia muscular Duchenne (DMD), es una enfermedad severa hereditaria, su mecanismo de transmisión es recesivo ligado al cromosoma X, afecta a 1 de cada 3500 varones nacidos vivos (1). Los varones con DMD suelen empezar la sintomatología entre los 3 y los 5 años. Se caracteriza por degeneración de las fibras musculares esqueléticas, debilidad muscular progresiva, pérdida de la deambulación entre los 10 y 12 años; el deterioro posterior lleva a lordosis lumbar, contracturas articulares y muerte por insuficiencia respiratoria o cardiaca, generalmente antes de los 20 años de vida. La distrofia muscular Becker (BMD), es una forma alélica menos severa, la edad media de inicio es de 11 años, con pérdida de la deambulación después de los 16 años y una frecuencia de 1:30 000 varones nacidos vivos (1 – 3). El gen de la DMD se localiza en el brazo corto del cromosoma X, en la región Xp21, tiene 79 exones en una longitud de 2,5 megabases (4, 5). Codifica una proteína llamada distrofina, una proteína del citoesqueleto que, junto a las glicoproteínas asociadas a la distrofina (DAG), une la membrana sarcolemal con la matriz extracelular. El papel de la distrofina en la membrana sarcolemal del músculo aún no esta claro, su distribución en la superficie del sarcolema e interacción con las DAG puede actuar a manera de anclaje y protección del músculo durante la contracción y relajación del mismo (1, 6 – 8). Aproximadamente, 60 % de los afectados tienen una deleción de uno o más exones y, aproximadamente, 6 % tiene duplicación de exones (1). La localización de las deleciones se distribuye principalmente en dos regiones llamadas: punto caliente menor que incluye los exones 2 a 20 y punto caliente mayor que incluye los exones 44 a 53 (9, 10). Chamberlain y col. (11) y Beggs y col. (9), desarrollaron un método, mediante el uso de reacción en cadena de polimerasa (PCR) para detectar deleciones dentro del gen de la distrofina. Las frecuencias reportadas en diferentes poblaciones, utilizando PCR, varían en función del número de iniciadores utilizados y de la frecuencia poblacional de las distintas mutaciones dentro del gen, situándose entre 37 % y 98 % (9, 11 – 18). En Venezuela, se encontró 37,5 % de deleciones intragénicas y 77 % de ellas estuvo localizado en la región comprendida desde el exón 44 al 55 (19). El diagnóstico prenatal de DMD a través del ácido desoxirribonucleico (ADN), consiste, en detectar, por demostración directa, las mutaciones más frecuentes del gen y, si no están presentes, realizar análisis indirecto del gen a través de fragmentos de restricción de longitud polimórfica (20). La demostración directa de las mutaciones del gen puede realizarse de biopsia de vellosidades coriales o de amniocitos, por PCR, basado en tamizaje de deleciones (20), y/o transferencia Southern, basado en el tamizaje de deleción/duplicación (21). El objetivo de este trabajo fue realizar diagnóstico prenatal molecular directo de DMD.

Drs. Alisandra Morales de Machín, Wilmer Delgado, Lisbeth Borjas, Karile Méndez, William Zabala, Ernesto Solís, José Chacín, Karelis Urdaneta, Enrique Machín

Instituto de Investigaciones Genéticas de La Universidad del Zulia (IIG-LUZ).

Para descargar la investigación completa haga clik a continuación:

http://www.sogvzla.org/sogvzlaweb2014/saciverrevista.php

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