Efecto de dosis suprafisiológicas de calcitriol sobre la expresión proteica de células de músculo liso vascular
- netmd
- 1 de marzo de 2018
- Reumatología
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Resumen
Introducción:
El calcitriol, fundamental para mantener la homeostasis del calcio y el fósforo en el organismo, puede perjudicar al sistema vascular a dosis elevadas, aumentando el riesgo de calcificación.
Objetivo:
Evaluar la expresión diferencial de proteínas en células de músculo liso vascular sometidas a una dosis suprafisiológica de calcitriol.
Material y métodos:
Se cultivaron células de músculo liso vascular de rata (SMAC-R) en presencia de 10-7 M de calcitriol durante 10 días. Se valoró el cambio de fenotipo muscular a óseo mediante actividad fosfatasa alcalina, inmunocitoquímica, reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa a tiempo real (qPCR) y Western blot. Mediante electroforesis bidimensional y espectrometría de masas se evaluó el patrón diferencial de proteínas en presencia y ausencia de 10-7 M de calcitriol.
Resultados:
La exposición a una dosis alta de calcitriol disminuyó significativamente la expresión génica de elastina y la expresión génica y proteica de ?-actina, aumentado la expresión génica de osteocalcina y Runx2 y la proteica de osteoprotegerina. A nivel proteómico se identificaron 10 proteínas diferencialmente expresadas, destacando el aumento en superóxido dismutasa mitocondrial, proteínas del citoesqueleto, de formación de vesículas y del inflamasoma. Por el contrario, hubo 4 proteínas que disminuyeron su expresión, destacando alguna de tipo muscular.
Conclusiones:
En un modelo de células de músculo liso vascular sometidas a una dosis suprafisiológica de calcitriol se observó un aumento de expresión de proteínas del citoesqueleto, que forman vesículas de matriz y que participan en depurar radicales libres y en la respuesta inflamatoria. La pérdida de fenotipo muscular se vio representada por descensos en la expresión de proteínas típicamente musculares.
Carrillo López N1, Tuñón LePoultel D1,2, Quirós Caso C1,3, Rodríguez I1, Cannata Andía JB1, Naves Díaz M1
1 Servicio de Metabolismo Óseo y Mineral – Instituto Reina Sofía de Investigación Nefrológica – Red de Investigación Renal del Instituto de Salud Carlos III (REDinREN del ISCIII) – Universidad de Oviedo – Oviedo (España)
2 Laboratorio de Bioquímica – Hospital 12 de Octubre – Madrid (España)
3 Laboratorio de Medicina – Hospital Universitario Central de Asturias – Oviedo (España)
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